Le But de l'Électrophorèse

Le But de l'Electrophorese

L'electrophorese est un "puissant et peu coûteux moleculaire technique de separation", comme l'a declare le Dr William H. Heidcamp, dans le Laboratoire de Biologie Cellulaire Manuel. Diverses raisons existent pour la realisation de l'electrophorese, y compris la non-invasive de liaison aux molecules et la visualisation de la separation des molecules. Dans l'ensemble, l'electrophorese vise a fournir un moyen precis de l'analyse des substances, telles que votre sang et de l'ADN (acide desoxyribonucleique), qui sont difficiles a separer a l'aide de methodes conventionnelles.

L'electrophorese est un 'puissant et peu coûteux moleculaire technique de separation', comme l'a declare le Dr William H. Heidcamp, dans le Laboratoire de Biologie Cellulaire Manuel. Diverses raisons existent pour la realisation de l'electrophorese, y compris la non-invasive de liaison aux molecules et la visualisation de la separation des molecules. Dans l'ensemble, l'electrophorese vise a fournir un moyen precis de l'analyse des substances, telles que votre sang et de l'ADN (acide desoxyribonucleique), qui sont difficiles a separer a l'aide de methodes conventionnelles.
Definition

• l'Electrophorese est une technique empirique utilise dans la separation de molecules chargees (positifs et negatifs) comme les cellules et les proteines, en fonction de leur reponse en courant electrique.
  Plusieurs facteurs influent sur l'electrophorese, y compris le montant net charge, masse de la molecule, de tampon electrophoretique des medias comme du papier ou de gel. Dans l'electrophorese, les molecules se deplacent vers la charge electrique opposee, par exemple, une proteine avec un solde positif en charge se deplacer vers le cote negatif de la electrophoretique moyen. En outre, les molecules avec une plus petite masse se deplacer plus rapidement ou de les separer plus rapidement que les molecules avec une masse plus grande.

Histoire

• En 1937, un scientifique suedois, nomme Arne Tiselius developpe un appareil pour mesurer le mouvement des molecules de proteine, appelee le Deplacement des Limites de l'appareil. C'est en forme de U de l'appareil qui utilise une solution aqueuse, pour la separation de molecules de proteines.
  En 1940, electrophorese de zone de a ete introduit, qui utilise un milieu solide (par exemple, gel) et permet de coloration pour une meilleure resolution, ou la visualisation de la separation des molecules.
  Puis, en 1960, l'electrophorese capillaire a ete developpe pour fournir un polyvalent technique d'electrophorese. Ce type d'electrophorese permet la separation des molecules en utilisant aqueuse et solide mediums.

Molecule de Liaison

• l'Electrophorese, a l'aide de mediums, a dessein d'interagir avec les molecules de façon non invasive. Par exemple, le gel des mediums se lier a des molecules de proteines, sans perturber les proteines de structure et de fonction. Apres la liaison de molecules, de mouvement ou de separation est initiee par l'application d'un courant electrique. En outre, il est egalement possible de recuperer les molecules lie a la moyenne apres electrophorese.

Haute-Resolution de la Separation

• l'Electrophorese est conçu pour visualiser la separation des molecules. Ce resultat est obtenu par diverses methodes, y compris la coloration et l'autoradiographie.
  Autoradiographie utilise X-ray films de visualiser la position des molecules radioactives (par exemple, l'ADN) apres la separation. Ce type de visualisation est comparable a la prise de photos, ou le x-ray est comme un flash de l'appareil photo et le film x-ray, c'est comme le film utilise dans le developpement noir et blanc des photos. Dans l'electrophorese, les photos de molecules telles que les proteines dans le sang sont developpes a l'aide de l'autoradiographie.
  Dans la coloration, des colorants comme le bleu de coomassie et de noir amido sont melanges avec des molecules, avant ou apres le processus de separation. Par exemple, le melange de proteines avec coomasie colorant avant l'electrophorese donnera teinte chemins (des petits points ou des lignes) montrant le mouvement de la proteine au cours de la separation.

Analyse Quantitative

• un Autre but de l'electrophorese est d'obtenir des informations quantitatives apres la visualisation de la separation des molecules. Pour obtenir des donnees quantitatives, par exemple, le logiciel d'analyse d'image (2D et 3D logiciel de rendu) enregistre les resultats de l'electrophorese, comme des signaux numeriques. Ces signaux representent les molecules de position avant et apres l'electrophorese et sont ensuite utilisees pour l'analyse quantitative de 'in silico' (avec l'utilisation d'un ordinateur).